實時熒光PCR定量分析是通過實時檢測擴增產(chǎn)物量與起始靶基因量直接相關而定量。擴增產(chǎn)物熒光信號達到對數(shù)期的循環(huán)數(shù)Ct值與靶模板起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在負相關線性關系。即起始模板稀釋一倍達到對數(shù)期熒光強度所需的擴增循環(huán)就要增加一個循環(huán)數(shù)（Ct值）。

　　熒光定量PCR試劑盒的標本預處理說明：

　　選直腸試子或糞便浸出液(或血清、腦脊液、細胞培養(yǎng)物)0.1ml,糞便浸出液須自然沉淀10分鐘,取上清0.1ml(或0.1g固體標本)加裂解液1ml(0.5ml的4M異硫氰酸胍+0.5ml水飽和酚)變性裂解，強烈漩渦振蕩，再加100μl氯仿振蕩，最高速離心10分鐘，取上清加3×結合緩沖液(6M碘化納NaI)移至商業(yè)硅膠純化柱，用洗滌緩沖液(含70%EtOH的2M NaI液)洗柱兩次，加50μl DEPC處理的dH2O洗脫、離心收集純化的RNA?；蛄呀馍锨寮拥攘慨惐己?/10體積的2M醋酸鈉(PH4.0)置-20℃2小時再離心沉淀，75%冷乙醇洗滌一次，加50μl DEPC處理的dH2O溶解。